1,25-Dihydroxy Vitamin D EIA 96 tests

Le kit 1,25-dihydroxy vitamin d eia est un système de dosage complet pour la purification de la 1,25d dans des échantillons de patients par immunoextraction suivie d'une quantification par eia. Les échantillons de patients sont délipidés et la 1,25d est extraite des réactifs croisés potentiels par incubation pendant 90 minutes avec un anti-1,25d monoclonal en phase solide hautement spécifique. Le gel d'immunoextraction est ensuite lavé et la 1,25d purifiée est éluée directement dans des tubes d'essai en verre. Les éluats et les calibrateurs reconstitués sont incubés pendant une nuit avec un anti-1,25d de mouton hautement spécifique. Ensuite, une partie de ce mélange est incubée pendant 90 minutes sous agitation dans des puits de microplaques recouverts d'un anticorps spécifique de mouton. La 1,25d liée à la biotine est ensuite ajoutée et la plaque est agitée pendant 60 minutes supplémentaires avant d'être aspirée et lavée. De l'avidine marquée par une enzyme (peroxydase de raifort) est ajoutée et se lie sélectivement à la biotine complexée et, après une autre étape de lavage, la couleur est développée en utilisant un substrat chromogène (tmb). L'absorbance est lue dans un lecteur de plaques de microtitration, l'intensité de la couleur développée étant inversement proportionnelle à la concentration de 1,25d.