EPO ELISA (Erythropoietin) 96 tests

Le test Elisa de l'érythropoïétine est un test quantitatif spécifique pour la détermination de l'érythropoïétine dans le sérum. L'epo humaine est une protéine fortement glycosylée composée de 165 acides aminés. Les taux sériques d'epo dépendent du taux de production et du taux de clairance de la protéine. La quantification de l'érythropoïétine sérique est utile pour rechercher la cause de l'anémie ou de l'érythrocytose.

L'epo Immunoessai est un elisa pour la mesure de la chaîne biologiquement active de 165 acides aminés de l'epo. Il utilise deux anticorps monoclonaux de souris différents dirigés contre l'epo humaine et spécifiques de régions bien définies de la molécule d'epo. Dans ce test, les standards, les contrôles ou les échantillons de patients sont incubés simultanément avec deux anticorps monoclonaux de souris contre l'epo humaine (l'un biotinylé et l'autre couplé à l'hrp) dans un puits de microplaque recouvert de streptavidine. À la fin de l'incubation du test, la plaque de micropuits est lavée pour éliminer les composants non liés puis incubée avec le substrat, la tétraméthylbenzidine (tmb). Une solution d'arrêt acide est ensuite ajoutée pour arrêter la réaction et convertir la couleur en jaune. L'intensité de la couleur jaune est directement proportionnelle à la concentration d'epo dans l'échantillon. Une courbe dose-réponse des unités d'absorbance en fonction de la concentration est générée à partir des résultats obtenus avec les standards. Les concentrations d'epo présentes dans les contrôles et les échantillons de patients sont déterminées directement à partir de cette courbe. Les étalons ont été étalonnés par rapport à l'étalon international d'érythropoïétine de l'organisation mondiale de la santé (OMS) qui consiste en une epo dérivée d'adn recombinant. L'étalon de référence de l'oms utilisé était le 1er étalon international d'érythropoïétine (87/684).