Interferon-gamma (human)

Test immunoenzymétrique pour la mesure quantitative in vitro de l'interféron gamma (IFN-γ) humain dans le sérum et le plasma.

Le test IFN-γ-ELISA est un test immunologique à sensibilité amplifiée enzymatique en phase solide réalisé sur microplaque. L'essai utilise des anticorps monoclonaux (MAbs) dirigés contre des épitopes distincts de l'IFN-γ. Les étalons et les échantillons réagissent avec l'anticorps monoclonal de capture (MAb 1) déposé sur le puits de microtitration et avec un anticorps monoclonal (MAb 2). anticorps monoclonal (MAb 2) marqué à la peroxydase de raifort (HRP). Après une période d'incubation permettant la formation d'un sandwich : MAb 1 enrobé - IFN-γ humain - MAb 2 - HRP, la microplaque est lavée pour éliminer les anticorps marqués par une enzyme qui ne sont pas liés. l'anticorps marqué par une enzyme. L'anticorps marqué par l'enzyme lié est mesuré par une réaction chromogène. Une solution chromogène (TMB) est ajoutée et incubée. La réaction est arrêtée par l'ajout de la solution d'arrêt et la microplaque est lue à la longueur d'onde appropriée. est ensuite lue à la longueur d'onde appropriée. La quantité de renouvellement du substrat est déterminée par calorimétrie en en mesurant l'absorbance, qui est proportionnelle à la concentration d'IFN-γ.
Une courbe d'étalonnage est tracée et la concentration en IFN-γ dans les échantillons est déterminée par interpolation à partir de la courbe d'étalonnage. L'utilisation d'un lecteur ELISA (linéarité jusqu'à 3 unités OD) et d'une méthode sophistiquée de réduction des données (réduction des données polychromatiques) permet d'obtenir une grande sensibilité dans la détermination de la concentration d'IFN-γ. polychromatique) permettent d'obtenir une sensibilité élevée dans la gamme basse et une gamme d'étalonnage étendue.