PTH Intact Human ELISA 96 tests

Le test intact pth Elisa (1-84) est un test quantitatif spécifique pour la détermination de l'hormone parathyroïdienne intacte dans le sérum.
Le dosage de la pth intacte est important pour différencier l'hyperparathyroïdie primaire des autres formes d'hypercalcémie (non médiées par la parathyroïde), telles que les tumeurs malignes, la sarcoïdose et la thyrotoxicose. Le dosage de l'hormone parathyroïdienne est le moyen le plus spécifique de pour révéler l'hyperparathyroïdie primaire.

Le dosage immunologique de la pth intacte est un elisa pour la mesure de la chaîne de 84 acides aminés (biologiquement intacte) de la pth. Deux anticorps polyclonaux de chèvre différents dirigés contre la pth humaine ont été purifiés par chromatographie d'affinité pour être spécifiques de régions bien définies de la molécule de pth. L'anticorps de capture biotinylé se lie uniquement à la région médiane et à la pth terminale 39-84. L'anticorps de détection marqué à la hrp se lie uniquement à la pth 1-34 n-terminale. La pth 1-84 intacte forme le complexe en sandwich nécessaire à la détection en se liant à la fois à l'anticorps de capture biotinylé et à l'anticorps de détection marqué à la hrp. La capacité de l'anticorps biotinylé et du micropuits recouvert de streptavidine a été ajustée pour que l'interférence des fragments inactifs soit négligeable, même à des niveaux très élevés.
Dans ce test, les standards, les contrôles ou les échantillons de patients sont incubés simultanément avec l'anticorps marqué par l'enzyme hrp et un anticorps couplé à la biotine dans un puits de microplaque recouvert de streptavidine. A la fin de l'incubation de l'essai, la plaque de micropuits est lavée pour éliminer les composants non liés. Après le lavage, la plaque est incubée avec le substrat, la tétraméthylbenzidine (tmb). En présence de l'enzyme hrp, le substrat tmb se transforme en une couleur bleue. Une solution d'arrêt acide est ensuite ajoutée pour arrêter la réaction et convertir la couleur en jaune. L'intensité de la couleur jaune est directement proportionnelle à la concentration de pth intacte dans l'échantillon. Une courbe dose-réponse de l'unité d'absorbance en fonction de la concentration est générée en utilisant les résultats obtenus à partir des standards. Les concentrations de pth intacte présentes dans les contrôles et les échantillons de patients sont déterminées directement à partir de cette courbe.