Tsh recepteur anticorps

L'autoanticorps (TRAb) du récepteur de la TSH (TSHR) est destiné à être utilisé par des professionnels uniquement pour la détermination quantitative de TRAb dans le sérum humain. L'hyperthyroïdie dans la maladie de Basedow est due à la présence d'auto-anticorps contre le TSHR et la mesure de ces auto-anticorps peut être utile pour le diagnostic et la gestion de la maladie. gestion de la maladie.

Dans le test ELISA, les TRAb présents dans le sérum des patients, les calibrateurs et les contrôles peuvent interagir avec la TSHR enduite sur les puits de la plaque ELISA. Après une incubation de 2 heures, les échantillons sont éliminés, laissant les TRAb liés à la TSHR immobilisée. Un auto-anticorps monoclonal humain dirigé contre le TSHR, marqué à la biotine (M22-biotine), est ajouté dans une deuxième étape d'incubation, où il interagit avec le TSHR immobilisé qui n'a pas été bloqué par TRAb lié. La quantité de M22-biotine liée à la plaque est ensuite déterminée dans une troisième étape d'incubation par l'ajout de streptavidine peroxydase (SA-POD), qui se lie spécifiquement à la biotine. L'excès de SA-POD non lié est ensuite éliminé et l'addition du substrat de la peroxydase, la 3,3',5,5'-tétraméthylbenzidine (TMB), entraîne la formation d'une couleur bleue. Cette réaction est arrêtée par l'addition d'une solution d'arrêt, ce qui fait passer le contenu du puits du bleu au jaune. L'absorbance du mélange réactionnel jaune à 450 nm est ensuite lue à l'aide d'un lecteur de plaques ELISA. Une absorbance plus faible indique la présence de TRAb dans un échantillon à tester (car TRAb inhibe la liaison de la biotine M22 aux puits de la plaque revêtus de TSHR dans les puits de la plaque).