Microsporidies - typage E. Bieneusi/E. Intestinalis (PCR Tps Réel) 1 Kit

Le coffret de PCR en Temps réel Microsporidies - génotypage est utilisé pour l’identification moléculaire qualitative de certaines microsporidies à partir d’échantillons humains de selle ou d’urine par un système d’amplification par PCR en temps réel.

Ce coffret repose sur une réaction d’amplification d’acides nucléiques spécifiques et une analyse en temps réel de l’activité 5’ nucléase de l'ADN polymérase par un système optique de détection de la fluorescence.
des réactions d’amplification spécifique d’un fragment du gène codant l’arn ribosomal 18s des microsporidies sont réalisées à partir de l'ADN extrait de l’échantillon. une sonde spécifique de enterocytozoon bieneusi est marquée par le fluorochrome fam et émet une fluorescence spécifique suite à son hydrolyse au cours de l’élongation du produit d’amplification de e. bieneusi. Une sonde spécifique de encephalocytozoon intestinalis est marquée par le fluorochrome yakima yellow et émet une fluorescence spécifique suite à son hydrolyse au cours de l’élongation du produit d’amplification de e. intestinalis. la mesure des intensités de fluorescence en temps réel relate l’accumulation des produits d’amplification spécifiques, sans nécessiter de manipulation des amplicons après l’amplification.
ce système d’amplification a été validé à partir d’échantillons humains de selles ou d’urine. le coffret de pcr en temps réel microsporidies - génotypage comporte un système prêt à l’emploi spécifique pour l’identification moléculaire des microsporidies des espèces e. bieneusi et e. intestinalis. le coffret contient les réactifs et les enzymes nécessaires à l’amplification de l'ADN de ces microsporidies. la fluorescence est émise et mesurée de façon individuelle par un système optique au cours de la pcr. la détection des fragments amplifiés d'ADN de microsporidies de l’espèce e. bieneusi est réalisée par un fluorimètre en utilisant le canal 530, tandis que la détection des fragments amplifiés d'ADN de microsporidies de l’espèce e. intestinalis est mesurée sur le canal 560. le marqueur d’extinction moléculaire est un marqueur non-fluorescent (black hole quencher) : bhq1.
des contrôles positifs externes sont fournis dans le coffret.