Toxoplasma gondii (PCR Tps Réel) 1 Kit

Le coffret de PCR en Temps réel Toxoplasma gondii est utilisé pour la détection qualitative ou quantitative de l’ADN parasitaire de Toxoplasma gondii dans les échantillons humains de sang total (collecté dans un tube EDTA), liquide amniotique, lavage broncho-alvéolaire, liquide céphalo-rachidien et biopsie (placenta).

Ce coffret repose sur une réaction d’amplification d’acides nucléiques spécifiques et une analyse en temps réel de l’activité 5’ nucléase de l'ADN polymérase par un système optique de détection de la fluorescence.
des réactions d’amplification spécifique de l’élément répété rep 529 (200 à 300 copies/génome), et d’un contrôle interne d’inhibition sont réalisées à partir de l'ADN extrait de l’échantillon. la sonde spécifique de toxoplasma gondii est marquée par le fluorochrome fam et émet une fluorescence spécifique suite à son hydrolyse au cours de l’élongation du produit d’amplification de t. gondii. la sonde spécifique du contrôle interne compétitif est marquée par le fluorochrome hex et émet une fluorescence spécifique suite à son hydrolyse au cours de l’élongation du produit d’amplification du contrôle interne. la mesure des intensités de fluorescence en temps réel relate l’accumulation des produits d’amplification spécifiques, sans nécessiter de manipulation des amplicons après l’amplification.
ce système d’amplification a été validé à partir d’échantillons de sang total (collecté dans un tube edta), liquide amniotique, lavage broncho-alvéolaire, liquide céphalo-rachidien et biopsie (placenta). le coffret de PCR en temps réel toxoplasma gondii comporte un système prêt à l’emploi spécifique pour la détection de toxoplasma gondii. le coffret contient les réactifs et les enzymes nécessaires à l’amplification de l'ADN de t. gondii. la fluorescence est émise et mesurée de façon individuelle par un système optique au cours de la pcr. la détection des fragments amplifiés d'ADN de t. gondii est réalisée par un fluorimètre en utilisant le canal 530. le marqueur d’extinction moléculaire est un marqueur non-fluorescent (black hole quencher) : bhq1.
en parallèle, ce coffret contient un système pour identifier les possibles inhibitions de pcr en mesurant la fluorescence d’un contrôle interne sur le canal 560. le marqueur d’extinction moléculaire est un marqueur non-fluorescent : bhq1.
un contrôle positif externe d’amplification permettant de déterminer la charge parasitaire est fourni dans le coffret à la concentration de 200 équivalents génomes de toxoplasmes/µl.