Kit ELISA compétitif 8-OHdG

Le dosage ELISA multispecies 8-Hydroxydeoxyguanosine (8-OHdG) quantifie 8-OHdG dans le sérum, le plasma et d'autres fluides biologiques

Le dosage ELISA multispecies 8-Hydroxydeoxyguanosine (8-OHdG) quantifie 8-OHdG dans le sérum, le plasma et d'autres fluides biologiques

Principe de la méthode :

Le kit de recherche ELISA multispecies compétitif est conçu pour mesurer quantitativement 8-Hydroxydeoxyguanosine (8-OHdG) indépendamment de l'espèce. Un standard de 8-OHdG est fourni pour générer une courbe standard pour le test et tous les échantillons sont lus sur une courbe standard générée par l'utilisateur. Les standards ou les échantillons dilués sont pipetés dans une plaque microtitrée enduite et un anticorps de détection biotinylé spécifique à 8-OHdG est ajouté. L'excès de conjugué et les échantillons ou standards non liés sont lavés de la plaque, et l'Avidine conjuguée à la Peroxydase de Raifort (HRP) est ajoutée à chaque puits et incubée. Ensuite, une solution de substrat TMB est ajoutée à chaque puits. La réaction enzyme-substrat est terminée par l'ajout de la solution d'arrêt et le changement de couleur est mesuré sur un lecteur de microplaques. La concentration de 8-OHdG dans les échantillons est ensuite déterminée en comparant l'OD des échantillons à la courbe standard.

Validation rigoureuse :

Chaque lot fabriqué de ce kit ELISA est testé pour des critères tels que la sensibilité, la spécificité, la précision et la cohérence de lot à lot. Voir le manuel pour plus d'informations sur la validation.

Informations sur la cible
L'oxygène est nécessaire à la vie aérobie, il peut également participer à des réactions potentiellement toxiques impliquant des radicaux libres d'oxygène et des métaux de transition tels que le fer qui endommagent les membranes, les protéines et les acides nucléiques. Dans une cellule humaine normale, il y a une accumulation constante de lésions de l'ADN au fil du temps. Une partie substantielle de ces lésions est due à des facteurs endogènes qui endommagent l'ADN. Ceux-ci incluent des espèces réactives de l'oxygène dérivées de la respiration oxydative. De plus, les cellules malignes peuvent produire du peroxyde d'hydrogène à des niveaux aussi élevés que ceux caractéristiques des leucocytes polymorphonucléaires stimulés. Certains tumeurs peuvent stimuler les systèmes de défense du corps afin qu'ils réagissent contre la tumeur pour produire des cytokines. Certaines cytokines peuvent produire de grandes quantités de ROS. 8-OHdG est l'une des lésions les plus largement étudiées de ce type. La présence de résidus de 8-OHdG dans l'ADN conduit à une transversion GC en TA à moins que des réparations ne soient effectuées avant la réplication de l'ADN. Par conséquent, la présence de 8-OHdG peut conduire à la mutagenèse. De plus, de nombreuses observations indiquent une corrélation directe entre la formation de 8-OHdG et la carcinogenèse in vivo. Il est généralement accepté que les produits de réparation de l'ADN cellulaire, par exemple 8-OHdG, sont excrétés dans l'urine sans métabolisme supplémentaire. Par conséquent, 8-OHdG a été proposé comme biomarqueur urinaire pour les lésions oxydatives de l'ADN in vivo.