Kit ELISA humain HMGB-1

L'ELISA pour la protéine B1 du groupe de haute mobilité humaine (HMGB-1) quantifie HMGB-1 dans le sérum, le plasma et d'autres fluides biologiques

L'ELISA pour la protéine B1 du groupe de haute mobilité humaine (HMGB-1) quantifie HMGB-1 dans le sérum, le plasma et d'autres fluides biologiques.

Principe de la méthode :

Le test ELISA sandwich en phase solide pour la protéine B1 du groupe de haute mobilité humaine (HMGB-1) est conçu pour mesurer la quantité de cible liée entre une paire d'anticorps appariés. Un anticorps spécifique de la cible a été pré-enduit dans les puits de la microplaque fournie. Les échantillons sont ensuite ajoutés dans ces puits et se lient à l'anticorps immobilisé (de capture). Le sandwich est formé par la liaison du second anticorps (de détection) à la cible sur un épitope différent de celui de l'anticorps de capture. Un anticorps conjugué avec une enzyme se lie au sandwich formé. Après des étapes d'incubation et de lavage pour éliminer les substances non liées de la microplaque, une solution de substrat est ajoutée qui réagit avec le complexe enzyme-anticorps-cible pour produire un signal mesurable. L'intensité de ce signal est directement proportionnelle à la concentration de la cible présente dans l'échantillon d'origine.

Validation rigoureuse :

Chaque lot fabriqué de ce kit ELISA est testé pour des critères tels que la sensibilité, la spécificité, la précision et la cohérence entre les lots. Voir le manuel pour plus d'informations sur la validation.

Informations sur la cible :

La protéine HMGB1 (High-mobility group box-1) a été initialement décrite comme une protéine chromosomique de liaison à l'ADN non-histone nucléaire. Cependant, des études récentes indiquent que les cellules endommagées et nécrotiques libèrent HMGB1 dans le milieu extracellulaire où elle fonctionne comme une cytokine pro-inflammatoire. La HMGB1 de souris est exprimée sous forme d'une chaîne polypeptidique unique de 215 acides aminés contenant trois domaines : deux domaines de liaison à l'ADN chargés positivement liés en tandem (boîte HMG A, aa 9-79 ; et boîte B, aa 89-162), et une région de queue acide C-terminale chargée négativement de 30 aa. Les résidus 28 - 44 et 180 - 185 contiennent un signal de localisation nucléaire (NLS). L'activité cytokine de HMGB1 est contenue dans la boîte B, tandis que la boîte A est associée au domaine hélice-boucle-hélice des facteurs de transcription. HMGB1 agit à la fois comme un médiateur inflammatoire qui favorise la migration des monocytes et la sécrétion de cytokines, ainsi qu'un médiateur des interactions entre les cellules T et les cellules dendritiques. HMGB1 est sécrétée et agit pour transmettre des signaux cellulaires via son récepteur de haute affinité, RAGE, et possiblement, TLR2 et TLR4. HMGB1 est hautement conservée et ubiquitaire dans les noyaux et le cytoplasme de presque tous les types de cellules, et est un médiateur nécessaire et suffisant de l'inflammation lors des réponses stériles et associées aux infections. HMGB1 agit également comme une protéine de liaison à l'ADN nucléaire qui a récemment été montrée comme un déclencheur précoce de l'inflammation stérile dans des modèles animaux de traumatisme-hémorragie via l'activation du récepteur Toll-like 4 (TLR4) et du récepteur des produits de glycation avancée (RAGE). De plus, il est rapporté que le niveau de HMGB1 est élevé lors de lésions tissulaires stériles, d'infections, d'endotoxémie létale ou de sepsis, d'arthrite induite par le collagène, et de lésions tissulaires induites par ischémie-reperfusion.