Kit ELISA souris HMGB-1

La souris HMGB-1 (High Mobility Group Protein B1) ELISA quantifie HMGB-1 dans le sérum, le plasma et d'autres fluides biologiques

La souris HMGB-1 (High Mobility Group Protein B1) ELISA quantifie HMGB-1 dans le sérum, le plasma et d'autres fluides biologiques.

La souris HMGB-1 (High Mobility Group Protein B1) ELISA sandwich en phase solide (enzyme-linked immunosorbent assay) est conçue pour mesurer la quantité de la cible liée entre une paire d'anticorps appariés. Un anticorps spécifique à la cible a été pré-enduit dans les puits de la microplaque fournie. Les échantillons sont ensuite ajoutés dans ces puits et se lient à l'anticorps immobilisé (capture). Le sandwich est formé par la liaison du deuxième anticorps (détecteur) à la cible sur un épitope différent de celui de l'anticorps de capture. Un anticorps conjugué avec une enzyme se lie au sandwich formé. Après les étapes d'incubation et de lavage pour débarrasser la microplaque des substances non liées, une solution de substrat est ajoutée qui réagit avec le complexe enzyme-anticorps-cible pour produire un signal mesurable. L'intensité de ce signal est directement proportionnelle à la concentration de la cible présente dans l'échantillon original.

Validation rigoureuse :

Chaque lot fabriqué de ce kit ELISA est testé pour des critères tels que la sensibilité, la spécificité, la précision et la cohérence entre les lots. Voir le manuel pour plus d'informations sur la validation.

Informations sur la cible
La protéine HMGB1 (High-mobility group box-1) a été initialement décrite comme une protéine chromosomique de liaison à l'ADN non-histone nucléaire. Cependant, des études récentes indiquent que les cellules endommagées et nécrotiques libèrent HMGB1 dans le milieu extracellulaire où elle fonctionne comme une cytokine pro-inflammatoire. La souris HMGB1 est exprimée sous forme d'un polypeptide à chaîne unique de 215 acides aminés contenant trois domaines : deux domaines de liaison à l'ADN chargés positivement en tandem (boîte HMG A, aa 9-79 ; et boîte B, aa 89-162), et une région de queue acide C-terminale chargée négativement de 30 aa. Les résidus 28 - 44 et 180 - 185 contiennent un signal de localisation nucléaire (NLS). L'activité cytokine de HMGB1 est contenue dans la boîte B, tandis que la boîte A est associée au domaine hélice-boucle-hélice des facteurs de transcription. HMGB1 agit à la fois comme un médiateur inflammatoire qui favorise la migration des monocytes et la sécrétion de cytokines, ainsi qu'un médiateur de l'interaction cellule T-cellule dendritique. HMGB1 est sécrétée et agit pour transduire des signaux cellulaires via son récepteur à haute affinité, RAGE et possiblement, TLR2 et TLR4. HMGB1 est hautement conservée et ubiquitaire dans les noyaux et le cytoplasme de presque tous les types de cellules, est un médiateur nécessaire et suffisant de l'inflammation lors de réponses stériles et associées à l'infection. HMGB1 agit également comme une protéine de liaison à l'ADN nucléaire qui a récemment été montrée comme un déclencheur précoce de l'inflammation stérile dans des modèles animaux de traumatisme-hémorragie via l'activation du récepteur Toll-like 4 (TLR4) et du récepteur des produits de glycation avancée (RAGE). De plus, il est rapporté que le niveau de HMGB1 est élevé lors de lésions tissulaires stériles, d'infections, d'endotoxémie létale ou de septicémie, d'arthrite induite par le collagène et de lésions tissulaires induites par l'ischémie-reperfusion.